Rozhodnutí nabylo právní moci dne 22.června 2016 <.>
<br>
<br>
<br>
Ministerstvo životního prostředí,Vršovická 65,100 10 Praha 10,(+420) 26712-1111,www.mzp.cz,info@mzp.cz
<br>
<br> ODESÍLATEL:
<br> Ing.XXXXX XXXXX,CSc <.>
ředitel odboru environmentálních rizik
a ekologických škod
Ministerstvo životního prostředí
Vršovická 65
100 10 Praha 10
<br>
<br>
<br> ADRESÁT:
<br> Vážený pan
RNDr.XXXXXX XXXXXX,CSc <.>
ředitel ÚEB AV ČR,v.v.i <.>
Ústav experimentální botaniky AV ČR <,>
v.v.i <.>
Rozvojová 263
165 02 Praha 6 - Lysolaje
<br> V Praze dne
Č.j.:
K č.j.:
Vyřizuje:
Tel.:
<br>
<br>
2.června 2016
39113/ENV/16
23920/ENV/16
<br> Ing.Routa
267 122 554
<br>
<br>
<br> R o z h o d n u t í
<br> Ministerstvo životního prostředí jako správní úřad příslušný podle § 5 zákona
č.78/2004 Sb <.>,o nakládání s geneticky modifikovanými organismy a genetickými
produkty,ve znění pozdějších předpisů,(dále jen „zákon“) a § 10 zákona č.500/2004
Sb <.>,správní řád,ve znění pozdějších předpisů <,>
<br> rozhodlo
<br> podle § 5 odst.8 zákona ve věci žádosti Ústavu experimentální botaniky AV ČR <,>
v.v.i <.>,se sídlem Rozvojová 263,165 02 Praha 6 - Lysolaje,o povolení k uvedení
geneticky modifikované sóji s genem LTB do životního prostředí (2016-2021) takto:
<br> Ústavu experimentální botaniky AV ČR,v.v.i.<,>
<br> Rozvojová 263 <,>
<br> 165 02 Praha 6 - Lysolaje <,>
<br> se u d ě l u j e p o v o l e n í
<br> k uvádění
<br> geneticky modifikované sóji s genem LTB do životního prostředí (2016-2021) <.>
<br>
<br>
<br>
<br>
<br>
2/13
<br>
<br>
<br> Ministerstvo životního prostředí,Vršovická 65,100 10 Praha 10,(+420) 26712-1111,www.mzp.cz,info@mzp.cz
<br> Náležitosti povolení podle § 18 odst.6 zákona:
<br> Oprávněná osoba
<br> Název: Ústav experimentální botaniky AV ČR,v.v.i <.>
Sídlo: Rozvojová 263,165 02 Praha 6 - Lysolaje
IČ: 613 89 030
<br> Specifikace geneticky modifikovaného organismu
<br> Jedná se o linii sóji (linie č.157),do níž byl vnesen úsek DNA exprimující v celé
rostlině gen kódující bakteriální enzym hygromycin fosfotransferázu.Tento enzym
rostlině uděluje rezistenci k antibiotiku hygromycinu.V rostlině je dále exprimován
gen LTB (gen pro netoxickou beta podjednotku enterického teplotně labilního toxinu
z Escherichia coli H10407) pod kontrolou promotoru a terminátoru zásobního
proteinu glycininu.Exprese tohoto genu se omezuje na semena rostliny <.>
<br> Specifikace genetické modifikace
<br> Geneticky modifikované rostliny byly vytvořeny vnesením DNA z plasmidu pGly::ER-
LTB do genomu odrůdy Jack.Biolisticky vnesený úsek DNA obsahuje pGly
(promotor genu pro glycinin),LTB (syntetický modifikovaný gen pro beta-
podjednotku enterického toxinu z Escherichia coli),t Gly (polyadenylační signál genu
pro glycinin),pUbi3 (promotor z bramborového genu pro ubikvitin),hpt (gen pro
hygromycin fosfotransferázu),tUbi3 (terminátor z bramborového genu pro ubikvitin) <.>
<br> Vektor s inzertem (pGly:ER-LTB) byl připraven a použit na pracovišti Plant Genetic
Research Unit,USDA Agricultural Research Service,Donald Danforth Plant Science
Center,Montana,USA.Z vektoru byl po vyštěpení do sóji biolisticky vnesen úsek
DNA o délce přibližně 5 kb <.>
<br> Gen LTB (gen pro beta podjednotku enterického toxinu z Escherichia coli H10407)
byl získán v podobě syntetického genu s kodóny uzpůsobenými translačnímu
aparátu bramboru.Syntetický gen je dále upraven takovým způsobem,že je na
svém C konci propojen s epitopem FLAG (DYKDDDDK) usnadňujícím jeho
imunodetekci.Epitop FLAG je následován signálem KDEL pro udržení proteinu
v endoplasmatickém retikulu.Produkt genu následně vytváří pentamery,které
umožňují navázání celého toxinu (toxická podjednotka není v konstruktu zahrnuta)
na střevní epitel zvířete <.>
Výše uvedená dárcovská baktérie nebyla použita ani na uvedeném americkém
pracovišti.Gen hpt zapojený pod rostlinnými regulačními sekvencemi z bramboru byl
rovněž získán z jiné laboratoře ve formě plazmidu a nebyl na pracovišti připravován
pro účely transformace sóji <.>
<br> Vložená DNA se nachází v jaderné DNA rostliny,jeden lokus na haploidní sádku
chromozómů.Místem integrace je s největší pravděpodobností jaderná DNA <,>
jak vyplynulo ze segregace zjištěné u sklizených XXXXX z TX rostliny.Transgen LTB
je exprimován z promotoru pGly,který je v chloropastech nefunkční <.>
<br>
<br>
<br>
<br>
3/13
<br>
<br>
<br> Ministerstvo životního prostředí,Vršovická 65,100 10 Praha 10,(+420) 26712-1111,www.mzp.cz,info@mzp.cz
<br> Zbývajících zhruba 650 párů bází představuje sekvence vektorů,z nichž byly
jednotlivé úseky původně klonovány <.>
<br> Zatímco gen hpt pro rezistenci rostliny k hygromycinu se exprimuje ve všech částech
rostliny,gen LTB je exprimován pouze v semenech sóji <.>
<br> U linie č.157 byl opakovaně v semenech detekován epitop FLAG,který je součástí
proteinu LTB <.>
<br> Všechny rostliny po transformaci byly selektovány na půdě s antibiotikem
hygromycinem a předpokládáme,že vnesený gen hpt byl v GMVR exprimován <.>
Protein LTB byl v extraktech rozpustnýc...